自從發現抗菌肽以(yi)來,已(yi)對抗(kang)菌肽的作(zuo)用(yong)(yong)機(ji)理進行了大量研究。目前已(yi)知的是,抗(kang)菌肽是通過作(zuo)用(yong)(yong)于細(xi)菌細(xi)胞(bao)膜而起作(zuo)用(yong)(yong)的,在此基(ji)礎上,提出了多(duo)種(zhong)抗(kang)菌肽與細(xi)胞(bao)膜作(zuo)用(yong)(yong)的模型。但嚴格(ge)地(di)說,抗(kang)菌肽以(yi)何種(zhong)機(ji)制殺(sha)死細(xi)菌至(zhi)今還沒有*弄清楚(chu)。
目(mu)前一般認為,Cecropin類抗菌肽(tai)作用于(yu)細(xi)胞(bao)膜(mo),在膜(mo)上形成跨(kua)膜(mo)的(de)離子通(tong)道(dao),破(po)壞了膜(mo)的(de)完整性,造成細(xi)胞(bao)內容物泄漏,從而(er)殺死細(xi)胞(bao)。
對于抗菌肽(tai)破壞膜(mo)的完整性,使細胞內外屏(ping)障喪失,從而殺死細菌這一觀點已(yi)得到(dao)基本統一的認(ren)識,但對其(qi)具體作(zuo)用(yong)過程、是否存(cun)在(zai)(zai)特異性的膜(mo)受體、有無其(qi)它因子(zi)協同(tong)等問(wen)題尚不(bu)十分清楚,存(cun)在(zai)(zai)不(bu)同(tong)看法。不(bu)同(tong)抗菌肽(tai)的作(zuo)用(yong)機制可能不(bu)一樣,尚有待進(jin)一步研究
抗菌肽的基因工程
抗(kang)菌(jun)肽在動物體內(nei)含量(liang)極微。從動物體內(nei)提取抗(kang)菌(jun)肽產量(liang)低、費時長、工藝復雜、費用(yong)昂貴,無法實(shi)(shi)現大規模生產,這(zhe)成(cheng)為制約抗(kang)菌(jun)肽進(jin)入(ru)實(shi)(shi)際應(ying)用(yong)的大障礙。因此,開展抗(kang)菌(jun)肽基因工程研究具有重要意義。
目前,已進入(ru)臨床應用的基(ji)因(yin)(yin)工程藥物多(duo)數是采(cai)用原核(he)表達(da)系(xi)統生產的,但由于抗(kang)菌肽(tai)對細(xi)菌的殺傷作用,不能(neng)用原核(he)表達(da)系(xi)統直接表達(da)具有生物活性的抗(kang)菌肽(tai),而如果采(cai)用融合蛋白的形式表達(da),將(jiang)給表達(da)產物的后處理(li)帶來很大(da)麻煩。因(yin)(yin)此,國內外(wai)的研究者多(duo)采(cai)用真(zhen)核(he)表達(da)系(xi)統進行(xing)抗(kang)菌肽(tai)基(ji)因(yin)(yin)工程研究。
近年(nian)來,以酵(jiao)母為基(ji)(ji)因(yin)(yin)工程(cheng)受(shou)體(ti)菌的(de)研(yan)(yan)究(jiu)引起人們的(de)重(zhong)視,酵(jiao)母具有比大腸桿(gan)菌更完備的(de)基(ji)(ji)因(yin)(yin)表(biao)達(da)調控機(ji)制和對(dui)表(biao)達(da)產(chan)物的(de)加工修飾及分泌能力,并且不會(hui)產(chan)生內毒素,是基(ji)(ji)因(yin)(yin)工程(cheng)中良(liang)好(hao)的(de)真核基(ji)(ji)因(yin)(yin)受(shou)體(ti)菌。自1978年(nian)Hinnen等首先試(shi)驗酵(jiao)母轉化成功后,已有人干擾素基(ji)(ji)因(yin)(yin)、乙型肝炎(yan)表(biao)面(mian)抗原基(ji)(ji)因(yin)(yin)、α-淀(dian)粉酶基(ji)(ji)因(yin)(yin)等數十種外源基(ji)(ji)因(yin)(yin)在(zai)(zai)酵(jiao)母中獲(huo)得表(biao)達(da)。國內研(yan)(yan)究(jiu)者大量研(yan)(yan)究(jiu)表(biao)明,利用酵(jiao)母表(biao)達(da)抗菌肽(tai)是一條可(ke)行(xing)的(de)道路(lu),如能在(zai)(zai)表(biao)達(da)產(chan)率(lv)上得到進一步提(ti)高,將為抗菌肽(tai)早日進入臨床(chuang)應用奠定良(liang)好(hao)的(de)基(ji)(ji)礎。
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