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發色底物系列知識分析

更新時間:2022-06-28      點擊次數:1502

發色底物系列


首(shou)先人工合(he)(he)成(cheng)可(ke)以被(bei)(bei)待(dai)測凝血活(huo)(huo)酶(mei)催化(hua)(hua)裂解的(de)(de)化(hua)(hua)合(he)(he)物(wu),且化(hua)(hua)合(he)(he)物(wu)連(lian)(lian)接上(shang)產(chan)(chan)色(se)(se)物(wu)質(zhi),在(zai)檢(jian)測過程中(zhong)產(chan)(chan)色(se)(se)物(wu)質(zhi)可(ke)被(bei)(bei)解離下(xia)(xia)來,使(shi)被(bei)(bei)檢(jian)樣(yang)品中(zhong)出(chu)現顏色(se)(se)變化(hua)(hua),根(gen)據顏色(se)(se)變化(hua)(hua)可(ke)推(tui)算(suan)出(chu)被(bei)(bei)檢(jian)凝血活(huo)(huo)酶(mei)的(de)(de)活(huo)(huo)性。產(chan)(chan)色(se)(se)物(wu)質(zhi)一(yi)般選用(yong)(yong)(yong)連(lian)(lian)接對硝基苯(ben)胺(PNA)。游離的(de)(de)PNA呈黃(huang)色(se)(se),其測定波(bo)長(chang)選用(yong)(yong)(yong)405nm。在(zai)這一(yi)波(bo)長(chang)下(xia)(xia),其它(ta)物(wu)質(zhi)對光的(de)(de)吸(xi)收小于PNA對光吸(xi)收的(de)(de)1%。具(ju)體檢(jian)測方(fang)法(fa)即(ji)可(ke)采用(yong)(yong)(yong)動態法(fa)、也可(ke)采用(yong)(yong)(yong)終(zhong)(zhong)點(dian)法(fa)。動態法(fa)即(ji)是連(lian)(lian)續記錄(lu)樣(yang)品的(de)(de)吸(xi)光度(du)變化(hua)(hua),算(suan)出(chu)單(dan)位時間(jian)吸(xi)光度(du)的(de)(de)變化(hua)(hua)量,并以每(mei)分(fen)鐘吸(xi)光度(du)的(de)(de)變化(hua)(hua)來報告(gao)結(jie)果。終(zhong)(zhong)點(dian)法(fa)即(ji)是指在(zai)活(huo)(huo)性酶(mei)同產(chan)(chan)色(se)(se)物(wu)質(zhi)作用(yong)(yong)(yong)一(yi)段(duan)時間(jian)后,加入(ru)乙酸終(zhong)(zhong)止反(fan)應,檢(jian)測此段(duan)時間(jian)內吸(xi)光度(du)的(de)(de)變化(hua)(hua),進(jin)而推(tui)算(suan)出(chu)待(dai)檢(jian)酶(mei)的(de)(de)活(huo)(huo)性。凝血儀上(shang)多數采用(yong)(yong)(yong)動態法(fa),因為它(ta)比終(zhong)(zhong)點(dian)法(fa)簡(jian)單(dan)、結(jie)果更(geng)為準確(que)。其優點(dian)主要表現在(zai):

用酶學(xue)方法(fa)直接定(ding)量、測定(ding)結果準確、重復性好(hao)、便于自(zi)動化(hua)和(he)標準化(hua)、所需(xu)樣品量小。

發色底物S-2222 TM Xa因子的發色底物

Bz-IIe-Glu(γ-OR)-Gly-Arg-pNA•HCl

R = H(50%)和R = CH 3(50%)

分子量:741.3



S-2238 TM 凝血酶的發色底物

H-D-Phe-Pip-Arg-pNA•2HCl

分子量:625.6



S-2251 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發色底物

H-D-Val-Leu-Lys-pNA•2HCl

分子量:551.6



S-2288 TM t-PA和其他廣泛絲氨酸蛋白酶的顯色底物

H-D-Ile-Pro-Arg-pNA•2HCl

分子量:577.6

S-2302 TM 血漿激肽釋放酶和因子XIIa的發色底物

H-D-Pro-Phe-Arg-pNA•2HCl

分子量:611.6



S-2366 活化蛋白C和因子XIa的發色底物

pyroGlu-Pro-Arg-pNA•HCl

分子量:539.0



S-2403 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發色底物

pyroGlu-Phe-Lys-pNA•HCl

分子量:561.0



S-2765 Xa因子的發色底物

Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA•2HCl

分子量:714.6




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